Nat Neurosci:对小鼠,非人类灵长类动物和人类中功能不同的中间神经元进行病毒感染操作

2021-12-27 01:44:59 来源:
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大规模的磷酸化一组分析正在迅速揭示在特定蛋白质种类中所从前表达与人脑精神疾病相关的DNA。明白和疗程这些疾病的方法有将需要载体和借助特定人脑元亚型的方法有。因此,在值得注意灵长类和本能中所接触这些人群已变得至关举足轻重。重一组腺相关感染(rAAVs)是在人脑的系统中所展开DNA传递的正因如此方法有,对特定的人脑元个体未内在的软性。的系统的加强子注意到已经通过必需以单蛋白质精度展开磷酸化一组和表征遗传学分析的新技术的最新发展而得到较快。但对于加强子并不需要的查找空间仍然相当大。为了比较大所我们的加强子并不需要,原作者并不需要最初分析Scn1a的管控局面,Scn1a是在不同人脑元个体中所表达的DNA,其破坏与严重的脑瘤病相关。结合用于走法走法核仁测序(scATAC-seq)数据库的单蛋白质测定与跨群落的基因序列特殊性相结合,原作者在该DNA附近提名了十个候选管控基因序列。原作者具体了三种加强子,一同载体表达Scn1a的人脑元个体的非常深。其中所,一种特定的短管控基因序列尽可能将感染表达限制为表达PV的小脑中所间人脑元(PV cIN)。

方法有:四名成年人(两名年长者/两名女性,年龄22-57岁)拒绝接受了一项外科治疗,开刀了人脑一一个组织(额叶和鲸鱼体)以疗程耐药脑瘤。在所有的病例中所,每个组织者都曾拒绝接受过一次初步的治疗,安放硬膜下和/或深度电极展开颅内受控,以具体脑瘤复发的位置。从鲸鱼和额叶收300μm切开,在鲸鱼切开中所,感染的载体是基底膜均有。在接种感染后7~14d对培养的人切开展开电生理记录。将培养的人切开转回到记录寝室。对固有膜和发光特性展开分析。大鼠分别保持在17.8–26.1℃和30–70%的宏观周围环境温度和湿润范围内。这些值被密切受控和依靠在啮齿动物聚居寝室。从柏克莱加州大学(MIT)的个体中所获了一只雌性普通狨狸(6岁大约)。幼小(2岁)雄性小熊猫(macacamulatta)来自宾夕法尼亚大学巴特勒分校的加州国家灵长类分析中所心。在小鼠脑切开支架(Zivic Instruments)上展开上端切开,并在冰冷的人工脑脊髓液(ACSF)中所解剖V1小脑。经过处理后,可用可用Nova-Seq S2 100反应器试剂盒(Illumina)展开测序。

结果:在经常性或病理发展只能(包括Dret综合征)核查回路早熟的更早动态的主要精神上是,在不可用转DNA动物的只能未能转至特定的蛋白质种类。即使转用有用的遗传策略性,年轻的PV cIN也难以带入靶标。直接影响它们的丰度(它们代表所有抑制性cIN的40%)并且浮现得相对较晚。非常广泛地说,在本分析中所具体的加强子包括了不具特殊临床意义的人脑元个体的访问简而言之。最显著的是,这些加强剂可以通过DNA治疗或闭环人脑元活性而潜在地用于减轻Dret综合征的衰弱症状。原作者事实证明角化和全身口服可用于有效地的感染传递到人脑。通过角化口服,不必要改善局灶性脑瘤,PFC功能精神上或鲸鱼失忆精神上。相对来说,的系统化替换成感染可用于需要新一轮干预的只能,例如,纠正普遍性脑瘤复发或精神病学和人脑退行性疾病。原作者的分析表明,对管控元素的合理断定为疗程周围环境中所特定蛋白质种类的获收包括了备注。举足轻重的是,事实证明我们的加强子并不需要方法有可示范到其他DNA。总体而言,我们注意到了一一组七个针对不同人脑元个体和中所枢人脑的系统周围不具独特特异性的加强剂。即使转用了合理的标准(对能够人群的软性> 90%),我们的方法有仍不具相比较的几率(> 20%)。此外,正如高度保守的基因序列所分析的那样,原作者测试的加强可数在包括本能在内的所有群落中所被证明不具同等的软性和有效地性。

Vormstein-Schneider, D., Lin, J.D., Pelkey, K.A. et al. Viral manipulation of functionally distinct interneurons in mice, non-human primates and humans. Nat Neurosci (2020).

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